一級和二級抗體

此條目介紹的是抗體的直接結合與間接結合。關於根據抗體出現時間順序的分類，請見「常規與非常規抗體」。

一級和二級抗體是兩種不同的抗體，前者直接與抗原結合，而後者則與已經和抗原結合的前者相結合。

一級抗體

一級抗體是針對抗原目標，如蛋白質、多肽、糖類或其它小分子等特異性結合的抗體。這種抗體通常不與染色劑結合，不能顯色。目前有許多單克隆/多克隆的一級抗體，可以和各種不同的生物分子的特定抗原表位高度特異、親和的結合。這些抗體不僅可以用於檢測特定的生物分子，而且可以測定它們的變化量，以及諸如磷酸化、甲基化、或糖基化的特定修飾情況。一級抗體對於檢測如癌症、糖尿病、帕金森氏症和阿茲海默症等疾病所特有的生物標記是非常有用的。此外也用於研究藥物動力學中的吸收、分佈、代謝及排泄過程，以及研究多藥耐藥的治療藥物。

紫色的一級抗體與紅色的抗原結合，綠色的二級抗體隨後與一級抗體結合形成一個標誌，該標誌用於間接檢測抗原。

二級抗體

二級抗體是指與一級抗體或其片段相結合的抗體，他們通常由探針所標記，因此在檢測、純化以及細胞分揀等應用場景下非常有用。二級抗體可以是多克隆或者單克隆的，並且可以特異針對整個免疫球蛋白，或者是其上如可結晶區段或抗原結合區段等片段。

對於不同的實驗室應用場景，通常會選用不同的二級抗體。或者說，某種二級抗體通常主要勝任某種應用場景。選擇的根據，是需要檢測的以及抗體的類型，例如是G型還是M型免疫球蛋白，以及標記的方式。哪一種二級抗體是最佳的選擇，通常是通過試錯法來確定的。

應用場景

二級抗體通常用於多種不同的生化分析中，例如:

• 酶聯免疫吸附試驗，包括許多HIV檢測測試
• 西方墨點法
• 免疫染色法
• 免疫組織化學染色法
• 免疫細胞化學染色法